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        基礎(chǔ)信息Product information
        產(chǎn)品名稱:

        小鼠腦成纖維細(xì)胞

        產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

        小鼠腦成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:巨核細(xì)胞白血病2抗體 鋅指蛋白348抗體 易位相關(guān)蛋白α/TRAP-α抗體 小鼠膀胱成纖維細(xì)胞 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 MDBK牛腎細(xì)胞 A375+EGFP人惡性黑色素瘤細(xì)胞+EGFP

        產(chǎn)品型號(hào):

        廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

        訪問量:844

        更新時(shí)間:2025-04-09

        產(chǎn)品特性Product characteristics

        小鼠腦成纖維細(xì)胞

        小鼠腦成纖維細(xì)胞

        商品屬性:

        組織來源

        產(chǎn)品規(guī)格

        細(xì)胞形態(tài)

        貨號(hào)

        腦組織

        5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

        成纖維細(xì)胞樣

        YS-01X7353

        細(xì)胞簡(jiǎn)介:

        小鼠腦成纖維分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

        原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

          一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

          1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

          2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

          3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

          4、 胎牛血清濃度為10%-80%

          5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

          7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

          8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

          二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

          1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

          2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

          3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

          4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

          5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

          6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

        方法簡(jiǎn)介:

        公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

        質(zhì)量檢測(cè):

        公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

        培養(yǎng)信息:

        培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

        換液頻率 每2-3天換液一次

        生長(zhǎng)特性 貼壁

        細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

        傳代特性 可傳3代左右

        消化液 0.25%

        培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

        小鼠腦成纖維細(xì)胞

        細(xì)胞傳代及凍存:

        細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
        如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

        原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

          ① 組織塊培養(yǎng)法

          組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

         ?、?消化培養(yǎng)法

         ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

          對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

         ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

          器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

        小鼠腦成纖維細(xì)胞


        公司正在出售的產(chǎn)品:

        粒細(xì)胞彈性蛋白酶   英文名稱:   Neuophil elastase   規(guī)格:      英文縮寫:   NE

        神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:      英文縮寫:   NF

        神經(jīng)絲蛋白   英文名稱:   neurofilame protein   規(guī)格:      英文縮寫:   NF

        核轉(zhuǎn)錄因子NF-KB   英文名稱:   Nuclear anscription Factor NF-KB   規(guī)格:      英文縮寫:   NF-KB

        豬傳染性胃腸病毒抗體(TGEV)試劑盒

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        SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

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        MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

        LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein 0.5mgLFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

        ALDH4A1 Protein Human 重組人 ALDH4A1 蛋白

        CTLA4重組食蟹猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

        MFI2 Protein Mouse 重組小鼠 MFI2 / CD228 / melanotransferrin 蛋白

        SEMA4A重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白  Protein

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